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AGAR BASE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS (SFP E TSC) 500G

Código: 9188A Marca:
R$ 709,66
Orçamento Estoque: 20 dias úteis

Ágar Clostridium Perfringens

Utilizado com suplementos seletivos e diferenciais para a recuperação de Clostridium perfringens.

 

Princípios do Procedimento:

A Digestão Enzimática de Caseína, Digestão Enzimática de Farelo de Soja e Extrato de Levedura fornecem nitrogênio, vitaminas e aminoácidos no Ágar Clostridium Perfringens. Metabissulfito de Sódio aumenta a tolerância do Clostridium perfringens ao oxigênio, agindo como um removedor de oxigênio. Citrato Férrico Amoniacal é utilizado para diferenciar Clostridium perfringens redutores de sulfito, permitindo a visualização de sulfureto de hidrogênio, que produz colônias pretas no meio. Ágar é o agente solidificante. Os suplementos antimicrobianos fornecem um alto grau de seletividade ao meio. A adição de Emulsão de Gema de Ovo pode produzir a atividade da lecitinase, causando o aparecimento de uma zona opaca ao redor da colônia.

Fórmula: Litro:
Digestão Enzimática de Caseína 15g
Digestão Enzimática de Farelo de Soja 5g
Extrato de Levedura 5g
Metabissulfito de Sódio 1g
Citrato Férrico Amoniacal 1g
Ágar 14g
pH Final: 7,6 ± 0,2 a 25ºC

 

Precauções:

  • Somente para o uso em laboratório;
  • Pode ser prejudicial se ingerido ou inalado. Irritante para os olhos, sistema respiratório e pele.

Modo de Preparo para SFP e TSC:

  1. Suspenda 41g do meio em 900mL de água purificada. Misture completamente;
  2. Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio;
  3. Autoclave a 121ºC por 15 minutos. Resfrie a 45–50ºC;
  4. Adicione 100 mL da Emulsão de Gema de Ovo, 50% (cód. 7982) e o suplemento antimicrobiano desejado:
    •      Ágar TSC: Adicione 10 mL da solução de Cicloserina 4% estéril;
    •      Ágar SFP: Adicione 10 mL da solução estéril contendo 3 mg de Sulfato de Polimixina B e 12 mg de Canamicina.

Ágar de Sobrecamada:

  • Suspenda 41g do meio em 1L de água purificada;
  • Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio;
  • Autoclave a 121°C por 15 minutos. Resfrie a 45–50ºC;
  • O Ágar de Sobrecamada não é suplementado com a Emulsão de Gema de Ovo. O Ágar de Sobrecamada é mantido a 45–50°C até a sua utilização e deve ser adicionado logo após a inoculação.

Especificações de Controle de Qualidade:

Aparência do meio:

  • Aparência Desidratado: O pó é homogêneo, fluxo livre e bege claro a médio;
  • Aparência Preparado: O meio preparado é bege claro a médio e com um ligeiro precipitado.

Resposta Esperada de Cultivo:

Preparado como Ágar TSC e Ágar SFP, suplementado como necessário. Após a inoculação da camada base, o meio foi coberto com o ágar de sobrecamada. Espécies de Clostridium foram incubadas sob condições anaeróbicas e todas as outras espécies foram incubadas sob condições aeróbicas a 35°C por 18–24 horas.

Ágar TSC:

Micro-organismo: Inóculo Aproximado (UFC): Resultados Esperados:
Clostridium perfringens ATCC® 10543 10–300 Suprimido para inibido colônias negras
onde presente
Clostridium perfringens ATCC® 13124 10–300 Colônias negras
Clostridium novyi ATCC® 17861  10–300 Suprimido para inibido
Clostridium tetani ATCC® 19406 10–300 Suprimido para inibido
Bacillus cereus ATCC® 11778 300 - 1000 Suprimido para inibido
Escherichia coli ATCC® 25922 300 - 1000 Suprimido para inibido
Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 300 - 1000 Suprimido para inibido

 

Ágar SFP:

Micro-organismo: Inóculo Aproximado (UFC): Resultados Esperados:
Clostridium perfringens ATCC® 10543 10 - 300 Colônias negras
Clostridium perfringens ATCC® 13124 10 - 300 Colônias negras
Clostridium novyi ATCC® 17861 10 - 300 Suprimido para inibido
Clostridium tetani ATCC® 19406  10 - 300 Suprimido para inibido
Bacillus cereus ATCC® 11778 300 - 1000  Suprimido para inibido
Escherichia coli ATCC® 25922  300 - 1000  Suprimido para inibido
Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 300 - 1000  Suprimido para inibido

 

Procedimento de teste:
Para uma discussão completa sobre o isolamento e identificação de C. perfringens e outras bactérias anaeróbicas referem-se a procedimentos específicos em referências apropriadas.


Resultados:
Clostridium perfringens produzem colônias negras em Agar TSC e Ágar SFP. Se a Emulsão da Gema de Ovo for adicionada, colônias podem ter um halo opaco ao redor da colônia negra devido à atividade da lecitinase. Todas as colônias negras deve ser confirmado. É improvável que as culturas cobertas por ágar produzam colônias negras.


Armazenamento:
Armazene o frasco selado contendo meio desidratado a 2 - 30ºC. Depois de aberto e recapeado, coloque o recipiente um ambiente de baixa umidade na mesma temperatura de armazenamento. Proteger da humidade e da luz.


Validade:
O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente, ou se a aparência tiver mudado do original cor. A validade se aplica ao meio em seu recipiente intacto quando armazenado conforme as instruções.


Limitações do procedimento:
1. Tanto as colónias negras lecitinase positivas como as negras lecitinase negativas devem ser consideradas presumíveis Clostridium perfringens em Agar TSC ou SFP. Realize testes confirmatórios;
2. Os anaeróbios facultativos positivos para gema de ovo podem crescer em Agar SFP produzindo placas completamente opacas, e
encobrindo a reação da gema de ovo de Clostridium perfringens.

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